原理DNA分子中的脱氧核(he)糖基，在酸性溶液中变成ω–羟基–γ–酮(tong)基戊醛，与二苯胺试(shi)剂作用生成蓝色(se)化合物（λmax=595）。在DNA浓度为20～200μg/ml范围内，吸(xi)光度与DNA浓度(du)成正比，可用比色法测定。在反(fan)应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。除DNA外，脱氧木(mu)糖，阿拉伯糖也有(you)同样的反应。其他多数糖类，包括核(he)糖在内，一般无此反应。操(cao)作步骤标准曲线的绘制 按下表加入各(ge)种试剂，混匀，于(yu)60℃恒温水浴保温45min,冷却后，在595nm波长下，进行比色测定，以(yi)DNA浓度为轮段或横坐标，光(guang)吸收值为纵坐标，绘制标准曲(qu)线。管号试剂012345标准DNA溶液/ml0.00.40.81.21.62.0蒸馏水/ ml2.01.61.20.80.40二苯胺试剂/ ml4.04.04.04.04.04.0A595nm样品的(de)测定 取2支试管，各加DNA样液1.0，蒸馏水1.0ml，混匀。然后准确加入二苯胺试剂4.0ml，混匀，于60℃恒温水(shui)浴保温45in ，冷却后，选(xuan)595nm波长，于722分光光(guang)度计上比色测定，根据所得的吸光度(du)对标准曲线求得DNA的质量（μg）。DNA含量的计算(suan) 根燃者据测得的光吸(xi)收值，从标准曲线上查出相当该光(guang)吸收值DNA的含量，按下式(shi)计算出样品中DNA的含量。W= m1/m2×100%式中W：DNA的质量分数（%）；m1：样液中测得的DNA的(de)质量（μg）；m2：样液中所含样品的质量（μg）；试剂和器材一、试剂1. DNA标准溶液（200μg/ml）：取小牛胸腺DNA钠盐(yan)以0.01mol/L氢氧化钠溶液配置成200μg/ml的溶液。2. DNA样液(ye)：准确称取DNA干制品以0.01mol/L氢氧化钠溶液配(pei)置成100μg/ml左右的溶液。3. 二苯胺试剂：称取纯二苯胺（如(ru)不纯，需在70%乙醇中重结晶2次）1g溶于100ml分析(xi)纯的冰醋酸中，再加入10ml过氯酸（A.R.,60%以上(shang)），混匀待用。当所用药品纯净时(shi)，配得试剂应为无色，临用前加入(ru)1ml1.6%乙醛溶液（乙醛溶液应保存于(yu)冰箱中，一周内可使用），贮(zhu)于棕色瓶。0.01mol/L NaOH溶液 5. 冰醋酸。6. 过氯酸。7. 1.6%乙醛溶液(ye)。二、器材1.坐(zuo)标纸腊伍。2. 吸管0.20ml、0.50ml、1.0ml。3. 试管1.5cm×15cm。4. 722型分光光度计。5. 恒温(wen)水浴锅标准曲线见
到底用什(shi)么来鉴定DNA 甲基绿(lu)还是二苯胺
用甲基绿来鉴定DNA。DNA遇甲(jia)基绿（常温）会被染成蓝绿色(se)。
甲基绿是雀扮具(ju)培纤有金属光泽的绿色微(wei)结晶或亮绿色粉(fen)末。溶于水，显蓝绿(lu)色。为碱性染料，它易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色(se)。
又称双绿SF。绿色晶体，具金黄色光泽(ze)，或淡绿色粉末(mo)。溶于水，呈蓝绿色。微溶于乙醇，不(bu)溶于乙醚、戊醇。
扩展资(zi)料：
甲基绿操作(zuo)注意事项：
1、操作人员应经过专门培训，严(yan)格遵守操作规程。
2、操作处置应(ying)在具备局部通风(feng)或全顷中灶面通风换气设施(shi)的场所进行。
3、避(bi)免眼和皮肤的接触，避免吸入蒸汽。
4、远离火种(zhong)、热源，工作场所严(yan)禁吸烟。
5、使用防爆型的(de)通风系统和设备(bei)。
6、如需罐装(zhuang)，应控制流速，且有接(jie)地装置，防止静电积聚。
7、避免与氧化剂(ji)等禁配物接触。
8、搬运(yun)时要轻装轻卸，防止包(bao)装及容器损坏。
9、倒空的容器可(ke)能残留有害物。
10、使用后洗手，禁止在(zai)工作场所进饮食。
11、配备相应品种和数量的消(xiao)防器材及泄漏应急(ji)处理设备。
参考(kao)资料来源：百度百科-甲(jia)基绿
参考资料来源(yuan)：百度百科-脱氧核糖核酸
二(er)苯胺与DNA反应的本质(zhi)二苯胺与(yu)DNA反应的本质：DNA在酸性条件下加热，其嘌呤(ling)碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂(lie)，生成嘌呤碱、脱氧核(he)糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在(zai)酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊醛，后者与(yu)二苯胺试剂反应生成蓝(lan)色物质。
二苯胺(an)的乙醇溶液加入9体(ti)积的浓硫酸（形成强酸性溶液）配制成二苯胺试剂，本试剂遇(yu)硝酸盐或硝酸产生蓝色的苯(ben)胺蓝沉淀，可用于鉴定硝酸盐。
扩展资料：
二苯胺试剂：
A液(ye)：1.5克二苯胺(an)溶于100ml冰醋酸中(zhong)，再加1.5ml浓硫酸，用棕色瓶保存（光下分解）。如冰醋酸呈结晶状态，则需加(jia)温后待其熔化再使用。
B液：体积分数为0.2%的乙醛(quan)溶液(CH3CHO)。
配制：将0.1mlB液加入10mlA液(ye)中，煮沸观察显色。
合成方法：
1、苯胺盐酸盐法：由苯胺(an)与苯胺盐酸盐缩合而得。
2、三氯化铝催化法：以(yi)苯胺为原料，三氯做拿(na)化铝为催化剂，经(jing)缩合反应而得。
3、苯酚缩合法：采用HD92催化剂，由苯酚与苯胺缩合而得。
4、苯胺以无水(shui)三氯化铝为催化剂，进行缩合反(fan)应。反应产物经盐酸盐析、氢氧化钠中合、和则煮洗、真空蒸馏、用乙醇结晶(jing)、分离即得成品。
5、工业二苯胺经精制(zhi)制得。
6、用纯棚(peng)搭氰化钾洗涤工业二苯胺，与铁、其他金属络合后，与二(er)苯胺分开。
7、在氮气流中把二苯(ben)胺减压蒸馏即得成品。
参考资料来源：百度百科-二苯胺(an)
二苯胺试剂鉴定dna错误(wu)的原因其鉴定原理基于二苯胺(an)能够与缺失的核苷酸形成磷(lin)酸亚胺，并与DNA中的未配对碱基生成特定(ding)的化学染色野枝盯反应，显色程度与未(wei)配对的碱基数量成(cheng)正比。因此，二(er)苯胺试剂的检测结论受到多种因素(su)的影响，如试剂的质量、反应条件、DNA质(zhi)量、存储条件等(deng)等。此外，DNA样搭和本可能包含各种杂(za)质，颂和如酶、盐等，这些杂质可能干(gan)扰试剂的正常反应，导致检测结果不准(zhun)确。因此，在使用二苯胺(an)试剂鉴定DNA时，需要注意检(jian)验环境与条件，同时，需保(bao)证DNA样本的纯度和完整性(xing)。
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